人幽門螺桿菌抗體IgG(HP IgG)酶聯免疫分析試劑盒使用說明書
本試劑盒僅供研究使用。
規格：96T
使用目的：
本試劑盒用于測定人血清、血漿及相關液體樣本中幽門螺桿菌抗體 IgG(HP IgG)表達。
實驗原理
本試劑盒應用雙抗原夾心法測定標本中人幽門螺桿菌抗體 IgG(HP IgG)表達。用純化的抗原包被微孔板，制成固相抗原，可與樣品中幽門螺桿菌抗體 IgG(HP IgG)相結合，經洗滌除去未結合的抗原和其他成分后再與 HRP 標記的抗原結合，形成抗原-抗體-酶標抗原復合物， 經過*洗滌后加底物 TMB 顯色。TMB 在 HRP 酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成終的黃色。用酶標儀在 450nm 波長下測定吸光度（OD 值），與 CUTOFF 值相比較， 從而判定標本中幽門螺桿菌抗體 IgG(HP IgG)的存在與否。
試劑盒組成
1 | 30 倍濃縮洗滌液 | 20ml×1 瓶 | 7 | 終止液 | 6ml×1 瓶 |
2 | 酶標試劑 | 6ml×1 瓶 | 8 | 陽性對照 | 0.5ml×1 瓶 |
3 | 酶標包被板 | 12 孔×8 條 | 9 | 陰性對照 | 0.5ml×1 瓶 |
4 | 樣品稀釋液 | 6ml×1 瓶 | 10 | 說明書 | 1 份 |
5 | 顯色劑 A 液 | 6ml×1 瓶 | 11 | 封板膜 | 2 張 |
6 | 顯色劑 B 液 | 6ml×1/瓶 | 12 | 密封袋 | 1 個 |
標本要求
1. 標本采集后盡早進行提取，提取按相關文獻進行，提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗，可將標本放于-20℃保存，但應避免反復凍融
2. 不能檢測含 NaN3 的樣品，因 NaN3 抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。操作步驟
1. 編號：將樣品對應微孔按序編號，每板應設陰性對照 2 孔、陽性對照 2 孔、空白對照 1
孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）
5. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置 30 秒后棄去，如此重復 5 次，拍干。
6. 加酶：每孔加入酶標試劑 50µl，空白孔除外。
7. 溫育：操作同 3。
8. 洗滌：操作同 5。
9. 顯色：每孔先加入顯色劑 A50µl，再加入顯色劑 B50µl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15 分鐘.
10. 終止：每孔加終止液 50µl，終止反應（此時藍色立轉黃色）。
11. 測定：以空白空調零，450nm 波長依序測量各孔的吸光度（OD 值）。 測定應在加終止液后 15 分鐘以內進行。
人幽門螺桿菌抗體IgG(HP IgG)酶聯免疫分析計算和結果判定：
試驗有效性：陽性對照孔平均值≥1.00; 陰性對照平均值≤0.10 臨界值（CUT OFF）計算：臨界值=陰性對照孔平均值+0.15
陰性判定：樣品 OD 值< 臨界值（CUT OFF）者為幽門螺桿菌抗體 IgG(HP IgG)陰性陽性判定：樣品 OD 值≥ 臨界值（CUT OFF）者為幽門螺桿菌抗體 IgG(HP IgG)陽性
。
注意事項
1. 操作嚴格按照說明書進行，本試劑不同批號組分不得混用。
2. 試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡 15-30 分鐘后方可使用，酶標包被板開封后如未用完，板條應裝入密封袋中保存。
3. 濃洗滌液可能會有結晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結果。
4. 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
5. 底物請避光保存。
6. 試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準，使用雙波長檢測時，參考波長為 630nm
7. 所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。終止液為 2M 的硫酸，使用時必須注意安全。
保存條件及有效期
1. 試劑盒保存：；2-8℃。
2. 有效期：6 個月
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