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ELISA操作用蔗糖封閉的原理

  • 發布日期:2016-05-16      瀏覽次數:2530
    •     ELISA封閉為了減少非特異性.也就是說,封閉中的蛋白會非特異性將elisa板子中沒有結合包被物的位點封閉掉,這樣之后加入的抗原或者抗體就不會再和板子發生非特異性的結合.使elisa的結果更加的準確。ELISA的試劑盒說明上寫封閉液用蔗糖溶液,一般是用BSA或酪蛋白的蛋白分子封閉空白位點,蔗糖封閉的原理:
      1、ELISA實驗中,蔗糖本身沒有封閉作用;
      2、封閉液一般是BSA、酪蛋白等或者是Tween等。
      3、加蔗糖的主要目的是保護ELISA板子吸附(包被)的蛋白,起到“保護劑"的作用。
      4、蔗糖溶液一般在ELISA板子經過BSA封閉后加,當然也有將蔗糖加到封閉液中同時進行處理;那一種更好需要你實驗后來驗證。但多數選擇前者。封閉劑還可用5%的脫脂乳,0.4%的明膠,但是實驗表明前者比較好,后者不容易洗干凈未結合上的明膠。
      封閉劑的原理就是與酶聯板上未結合抗原或抗體的微孔中用封閉劑封閉上,結合抗體或抗原的時候就不會產生非特異結合了,不會影響實驗的準確度。