干擾素蛋白表達(dá)問題解答

干擾素蛋白表達(dá)問題解答


請教各位幾個問題：我用pGEX-6p-1做的干擾素蛋白表達(dá)
問題1：采用一系列不同尿素濃度的復(fù)性緩沖液進(jìn)行復(fù)性，這一系列復(fù)性緩沖液可以重復(fù)利用嗎？如果還有其他蛋白可以同時使用進(jìn)行復(fù)性嗎？

答案1.現(xiàn)用現(xiàn)配，因為使用后的系列緩沖液各種成分（尿素，氧化型還原型谷胱甘肽等）濃度改變，你根本不好確定下次復(fù)性時的準(zhǔn)確條件，重復(fù)性不好把握；
問題2：復(fù)性后，不經(jīng)過過柱純化直接進(jìn)行抗病毒活性檢測可以嗎？

答案2.不經(jīng)過柱純化，直接用融合蛋白進(jìn)行抗病毒活性檢測么？那標(biāo)簽GST怎么辦，應(yīng)該上柱后酶切再收集目的蛋白檢測吧；
問題3：檢測有活性后可以直接用來免疫動物嗎？（同樣是未經(jīng)過柱純化）

答案3.結(jié)論同上。

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